Un ejemplo de Terapia Regenerativa o Terapia Celular

Tipo de Stem Cell

• Células madre mesenquimales derivadas de jalea de Wharton (WJ-MSC) 

Método de obtención

• Las WJ-MSC fueron proporcionadas por el Banco de células madre mesenquimales del cordón umbilical humano (Shandong, China). Se obtuvieron cordones umbilicales de madres sanas de fetos sanos a término sin antecedentes familiares de DM y sin antecedentes de cáncer, VHB, VHC, VIH, virus de Epstein-Barr (VEB), citomegalovirus (CMV) o sífilis detectada en suero.

Vía de administración

• Se les administraron dos infusiones WJ-MSC a través de las venas en el dorso de la mano (via parenteral)

Resultados a corto,mediano y largo plazo

• Durante el período de seguimiento, el IMC de los pacientes en el grupo I disminuyó marginalmente, mientras que se detectó un aumento gradual en el IMC de los pacientes del grupo II durante los períodos de seguimiento. A pesar de esto, las diferencias en el IMC entre los dos grupos no fueron significativas. Estos resultados sugirieron que la infusión de WJ-MSC no afecta el IMC de los pacientes con DM2.

Referencias:

Jianxia Hu, Long term effect and safety of Wharton's jelly-derived mesenchymal stem cells on type 2 diabetes
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4997981/

https://www.nature.com/articles/nature08894

Ejemplo de transgenico en la Diabetes

Los ratones transgénicos  de tipo KO se han utilizado para crear modelos específicos de diabetes tipo 1 y tipo 2, incluidos los ratones hIAPP, los ratones humanizados con aspectos del sistema inmunitario humano y los ratones que permiten la ablación condicional de las células beta que expresan una secuencia inversa del ARNm del GHSR, la disminución en los niveles de la proteína del GHS-R en el núcleo arqueado del hipotálamo se asoció con menor peso corporal, menor cantidad de tejido adiposo y menor ingesta de alimento que en el grupo control.
En ratones en que se anuló el gen de ghrelina (ghrl -/-) mediante una micro inyeccion y que recibieron una dieta alta en grasa, se observó una disminución del cociente respiratorio lo cual indica una mayor utilización de grasa como sustrato energético.

5 Desventajas de los Transgénicos 

• Proliferación de productos con nivel nutricional reducido.
• Resistencia a antibióticos
• Efectos secundarios de fármacos transgénicos (Alergias)
• Mayor contaminación química
• Recombinación de virus y bacterias puede originar nuevas enfermedades.

5 Ventajas de los Transgénicos 

• Mediante animales transgénicos permiten el estudio enfermedades.
• Posibilidad de incorporar características nutricionales en alimentos, fármacos y vacunas
•Reducción de productos químicos y mejor produccion agricola.
• Desarrollo de plantas resistentes a sequia, a climas adversos.
• Mejoramiento de cultivos, fármacos  

Referencia
Ghrelina, un péptido modulador del metabolismo energético. UNAM, 
https://www.medigraphic.com/pdfs/endoc/er-2007/er073d.pdf

El uso de modelos animales en la investigación de la diabetes. Aileen JF King

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3417415/

ADN recombinante artificial en la Diabetes

la insulina: los genes de las cadenas A y B de la insulina se clonan por separado en plásmidos; en ambos casos los fragmentos están fusionados a la β-galactosidasa (X-Gal), cada plásmido se introduce en 'E. coli' y la maquinaria de transcripción y traducción producen las cadenas A y B de la insulina que están unidas a la X-Gal por un residuo de metionina, se purifican ambas proteínas y se añade BrCN, la cual destruye la metionina, dejando libres las cadenas de insulina, obteniendo la insulina en su forma final.

REFERENCIAS 

Obtenido de : kuxulkab, Revista de divulgación científica

http://www.revistas.ujat.mx/index.php/kuxulkab/article/view/2627/2062

Recombinación de Ácidos Nucleicos en la Naturaleza

La recombinación consiste en la producción de nuevas combinaciones genéticas a partir de las generadas inicialmente por la anterior generación.

Conjugación: transferencia del material hereditario (ADN) de una bacteria a otra.

Referencias
Universidad de Granada

https://www.ugr.es/~eianez/Microbiologia/18conjuga.htm

PCR de metilacion en DM tipo 2

La alteración de la secreción de insulina es un sello distintivo de la diabetes tipo 2 (T2D). La epigenética puede afectar la susceptibilidad a la enfermedad. Para describir el metiloma humano en islotes pancreáticos y determinar la base epigenética de T2D, analizamos la metilación del ADN de 479,927 sitios CpG y el transcriptoma en islotes pancreáticos de T2D y donantes no diabéticos. 







Dayeh, T., Volkov, P., Salö, S., Hall, E., Nilsson, E., Olsson, AH,… Ling, C. (2014). El análisis de metilación del ADN de todo el genoma de islotes pancreáticos humanos de donantes diabéticos y no diabéticos tipo 2 identifica genes candidatos que influyen en la secreción de insulina. Genética PLoS , 10 (3), e1004160. doi: 10.1371 / journal.pgen.1004160

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3945174/

Prueba molecular para DM2

Los mecanismos moleculares del desarrollo del páncreas no son completamente conocidos, sin embargo, varios factores de diferenciación y factores transcripcionales han sido identificados como cruciales para la organogénesis y diferenciación pancreática, tal es el caso de Pax4.

BIBLIOGRAFÍA:

- Montúfar-Robles I, Ortiz-López M, Menjívar-Iraheta M. Detección molecular de variantes de secuencia del gen PAX4 en pacientes con Diabetes mellitus tipo 2 de inicio temprano del Hospital Juárez de México. Rev Med Grap Artem. 2006;31(7):69. Disponible en:

 http://www.medigraphic.com/pdfs/bioquimia/bq-2006/bqs061h.pdf

PCR en Diabetes Mellitus tipo 2

Tema: Detection of VDR gene ApaI and TaqI polymorphisms in patients with type 2 diabetes mellitus using PCR-RFLP method in a Turkish population

0bjetivo: Study if there was an association of VDR: g.59979GNT or c.1025- 49GNT (ApaIGNT) and g.60058TNC or c.1056TNC (TaqITNC) polymorphisms in the 3′ untranslated region of VDR with T2DM in a Turkish population.

Muestra: Sangre de los pacientes en tubos EDTA-blood 

Tipo: ADN genómico humano

Extracción: Standard salting out procedure

Gen: Gen VDR: Receptor de la vitamina D
         gen. 59979GNT o c.1025-49GNT (ApaIGNT))

         gen. 60058TNC o c.1056TNC (TaqITNC) 

PCR: PCR Multiplex

El programa de PCR touchdown se realizó a 94 ° C durante 3 min (desnaturalización inicial), 11 ciclos con 94 ° C durante 30 s, 72 a 62 ° C durante 30 s (disminuyendo 1 ° C por ciclo) y 72 ° C durante 30 s y 20 ciclos con 94 ° C durante 30 s, 62 ° C durante 30 s, 72 ° C 30 s, y 72 ° C durante 5 min (extensión final).

Visualización: Electroforesis 

Sensibilidad y Especificidad: Se usa para detectar mutaciones en los receptores y genes.

Referencias:

Dilmec F, Uzer E, Akkafa F, Kose E, van Kuilenburg ABP. Detection of VDR gene ApaI and TaqI polymorphisms in patients with type 2 diabetes mellitus using PCR-RFLP method in a Turkish population. J Diabetes Complications. mayo de 2010;24(3):186-91. 

disponible en: 

https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S1056872708001220

Pruebas de tamizaje y confirmación para Diabetes Mellitus

El esquema de tamizaje para DM consiste en la aplicación de dos pruebas dispuestas de manera seriada. En la primera, a través del cuestionario se explora la presencia de factores de riesgo para diabetes mellitus tipo 2 y la sintomatología. En la segunda prueba, se miden los niveles de glucosa, para finalmente, proceder a la confirmación diagnóstica a través de la medición de los niveles de glucosa sérica en ayuno.

Referencias:

Alvear M, Asa C. Consideraciones sobre el programa de Diabetes Mellitus en población mexicana: el caso del Distrito Federal. Río de Janeiro: Scielo; 2010.

disponible en: 

http://www.scielo.br/pdf/csp/v26n2/09.pdf

Alteraciones de la Epigenómica en la Diabetes

La metilación del ADN es la principal modificación epigenética del genoma y regula aspectos fundamentales de su función. Es un mecanismo de silenciamiento génico con un evidente papel en la represión transcripcional. En los seres humanos el ADN se metila únicamente en las citosinas, y más específicamente, en citosinas que estén unidas a guaninas a través de un enlace fosfato, es decir, en dinucleótidos «citosina-fosfato-guanina» o CpG. 

Recuperado de Geovanni Ramos Velasco, El papel de los cambios

epigenéticos en la diabetes mellitus tipo 2. 2016.

Recuperado de: http://www.diabetespractica.com/public/casos/pdf/revision/3

Alteraciones en la Traducción diabetes mellitus tipo 2

Como resultado de la transcripción en la Diabetes Mellitus tipo 2 se forma un tipo de ARN, el ARN largo no codificante (long noncoding RNA o ARNlnc), este permite la aparición de las células beta del páncreas.El ARNlnc se puede considerar como un intrón, segmento que no sintetizará proteínas, en lugar de ello controla genes que se expresan en nuestras enfermedades, que determinan nuestros rasgos físicos y personalidad. Se ha demostrado que al menos uno de estos ARNlnc regula la expresión de un gen íntimamente relacionado con la Diabetes llamado GLIS3.

Recuperado de Michael W King. Genetica de diabetes mellitus. 2016.

Recuperado de:

https://www.redalyc.org/html/434/43429451002/

Errores en la transcripción en la diabetes mellitus 1A

En la region VNTR (variable number of tandem repeat) I contiene 26-63 unidades repetidas (5’- ACAGGGGTGGTGGGG-3’), siendo los individuos homocigotos a VTNR I los que desarrollan más frecuentemente DM1A. Se ha encontrado que el tipo de VTNR I influye con la unión del factor de transcripción AIRE (Autoinmune Regulator) de tal forma que disminuye la tolerancia a la insulina y sus precursores. 

Referencia bibliografica:

Ferreira, A. Enfermedades autoinmunitarias asociadas a diabetes mellitus tipo 1. Scielo. 2014

Recupreado de: https://scielo.conicyt.cl/pdf/rmc/v143n8/art12.pdf

Relación génica de la Diabetes Mellitus secundaria a corticoesteroides

Geneticamente nuestro cuerpo no es capas de producir esta enfermedad, sin embargo al consumir farmacos con glucocorticoides,  nuestro cuerpo puede ser sensible para adquirir esta enfermedad, paciente presenta una disminución de las células beta, debido a mutaciones de PDX1, PTF1A, HNF1. 

Una reducción a la sensibilidad de la glucosa y su metabolismo por mutaciones en GCK, INS, HNF1A. 







Referencia bibliografica:
Gonzales, A. Mecanismos de accion y resistencia en glucocorticoides.Acta medica Costarricense. 2013. Recuperado de:
https://www.shmedical.es/wp-content/uploads/2016/06/casos-clinicos-vii-reunion-diabetes_2013.pdf#page=41

Diabetes Mellitus secundaria a corticoesteroides

Los corticoesteroides son fármacos que se utilizan para tratar ciertas enfermedades, el uso inapropiado de estos, puede arrojarnos efectos secundarios como la hiperglucemia.

Recuperado de: https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/001214.htm

Bienvenida

Un cordial saludo a las personas que revisan este contenido, bienvenidos a esta aventura de conocimiento de biología molecular, junto a mi persona, estudiante de medicina de la Universidad Central del Ecuador.

Este blog tiene por fin de entregar conocimiento basado en evidencia cientifica, la misma que sera obtenida mediante investigacion de libros, revistas, articulos cientificos, publicaciones, esperando que el mismo sea de su agrado.