PCR en Diabetes Mellitus tipo 2

Tema: Detection of VDR gene ApaI and TaqI polymorphisms in patients with type 2 diabetes mellitus using PCR-RFLP method in a Turkish population

0bjetivo: Study if there was an association of VDR: g.59979GNT or c.1025- 49GNT (ApaIGNT) and g.60058TNC or c.1056TNC (TaqITNC) polymorphisms in the 3′ untranslated region of VDR with T2DM in a Turkish population.

Muestra: Sangre de los pacientes en tubos EDTA-blood 

Tipo: ADN genómico humano

Extracción: Standard salting out procedure

Gen: Gen VDR: Receptor de la vitamina D
         gen. 59979GNT o c.1025-49GNT (ApaIGNT))

         gen. 60058TNC o c.1056TNC (TaqITNC) 

PCR: PCR Multiplex

El programa de PCR touchdown se realizó a 94 ° C durante 3 min (desnaturalización inicial), 11 ciclos con 94 ° C durante 30 s, 72 a 62 ° C durante 30 s (disminuyendo 1 ° C por ciclo) y 72 ° C durante 30 s y 20 ciclos con 94 ° C durante 30 s, 62 ° C durante 30 s, 72 ° C 30 s, y 72 ° C durante 5 min (extensión final).

Visualización: Electroforesis 

Sensibilidad y Especificidad: Se usa para detectar mutaciones en los receptores y genes.

Referencias:

Dilmec F, Uzer E, Akkafa F, Kose E, van Kuilenburg ABP. Detection of VDR gene ApaI and TaqI polymorphisms in patients with type 2 diabetes mellitus using PCR-RFLP method in a Turkish population. J Diabetes Complications. mayo de 2010;24(3):186-91. 

disponible en: 

https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S1056872708001220